mRNA-LNP 보관 조건

1. 장기 보관

• 권장 조건: -80°C

• 안정성: RNase 오염이 없고 적절한 보호제(동결보호제, 예: 수크로스, 트레할로스)가 포함된 완충액에서 보관 시 통상 6개월 ~ 1년 이상 안정적임 (제제 조성 및 로트에 따라 상이).

• 작업 권장사항: 분주 보관을 권장하며, 반복적인 동결-해동을 피해야 함. 용기 밀봉 상태를 유지하여 승화에 의한 농도 변화를 방지.

2. 중·단기 보관

• 권장 조건: -20°C

• 안정성: 단기간 보관에만 적합하며, 1–2주 이내 사용을 권장.

• 주의사항:

  • 위험 요소: -20°C는 얼음 결정이 형성되기 쉬운 온도 구간임. 동결보호제 농도가 충분하지 않을 경우 LNP 입경 증가, 입도 분포 확대, 봉입률 저하가 발생할 수 있음.

  • 적용성: 모든 제제가 -20°C 보관에 적합한 것은 아님. 특별히 최적화되지 않은 제제의 경우 장기 보관을 권장하지 않음.

3. 단기 보관 (냉장)

• 권장 조건: 4°C, 차광

• 안정성: 1–3일 이내 사용을 권장.

• 참고 사항: 특수 지질 조성 또는 최적화된 일부 고급 제제는 수주에서 수개월간 냉장 안정성을 보일 수 있음(냉장 안정형 제제). 다만 이는 구체적인 안정성 데이터에 근거하여 판단해야 함. 일반 제제의 경우 4°C 장기 보관 시 mRNA 가수분해 또는 봉입률 저하가 발생할 수 있음.

4. 권장되지 않는 조건

• 실온: 보관 불가. 작업 중 단시간 노출(희석, 분주, 형질전환 준비 단계 등)로만 제한.

• 반복적인 동결-해동: 1–2회 이하로 제한하며 반복을 피해야 함. 입자 응집, 봉입률 저하, 형질전환 효율 감소를 초래할 수 있음.

5. 동결-해동 시 작업 요령

• 해동 방법: 얼음 위 또는 4°C에서 서서히 해동할 것을 권장. 37°C 수조 등 급속 해동은 열 충격으로 LNP 구조를 손상시킬 수 있으므로, 검증된 경우를 제외하고는 피해야 함.

• 혼합: 해동 후에는 피펫팅 또는 가볍게 탭핑하여 부드럽게 혼합. 강한 볼텍싱은 피해야 함.

• 사전 분주: 초기 동결 전 1회 사용량으로 분주하여 필요 시마다 해동하여 사용.

6. 안정성에 영향을 미치는 주요 인자

다음 인자들은 제제의 실제 보관 안정성에 영향을 미치므로, 사용 시에는 각 로트별 검증 데이터를 참고할 것.

• mRNA 특성: 서열 길이, 이차 구조, 변형 유형(예: pseudouridine 변형)

• LNP 조성: 이온화 지질의 종류 및 비율, PEG-지질 함량, 지질 대 mRNA의 질소-인 비율(N/P ratio)

• 완충액 조건: pH(이온화 지질의 전하 상태에 영향), 이온 강도, 동결보호제(종류 및 농도)

• 환경 조건: 빛(광산화), RNase 오염 위험, 용기 재질(흡착성)