AAV 자주 묻는 질문

1. AAV는 과발현과 knockdown 중 어떤 용도에 적합한가요？

주로 유전자 과발현에 사용되며, shRNA, miRNA, CRISPR를 통해 knockdown/knockout도 가능합니다.

2. AAV의 최대 패키징 용량은？

약 4.7 kb이며, 이를 초과하면 역가 및 전달 효율이 감소합니다.

3. AAV에 형광 단백질을 넣을 수 있나요？

가능합니다 (GFP, mCherry, tdTomato 등). 발현 및 위치 분석에 사용됩니다.

4. 혈청형은 어떻게 선택하나요？

표적 조직, 투여 방식 및 종에 따라 선택합니다. AAV9는 CNS 및 전신 전달에 적합합니다.

5. 주요 투여 방법은？

꼬리정맥 주사, 뇌 정위 주사, 근육 주사, 안구 내 주사 등이 있습니다.

6. 보관 방법은？

-80°C 보관, 반복 동결-해동 방지, 소분 보관 권장.

7. 사용 전 처리 방법은？

얼음 위에서 천천히 해동 후 부드럽게 혼합합니다.

8. 최적의 발현 확인 시점은？

1~2주 후 발현 확인, 3~4주 후 안정화.

9. 세포 실험이 필요한가요？

in vitro 사전 검증이 권장됩니다.

10. 발현 효율을 높이는 방법은？

프로모터 최적화, 투여량 증가, 혈청형 선택, 발현 기간 연장.

11. 발현이 낮은 이유는？

프로모터 부적합, 혈청형 불일치, 낮은 용량, 너무 이른 분석 시점 등.

12. 유전체 통합이 일어나나요？

주로 episome 형태로 존재하며 통합 확률은 매우 낮습니다.

13. 면역 반응이 있나요？

낮지만 고용량 또는 반복 투여 시 발생할 수 있습니다.

14. CRISPR 적용이 가능한가요？

가능하며, 소형 Cas9 또는 이중 AAV 시스템이 사용됩니다.

15. AAV와 LNP의 차이는？

AAV는 장기 발현, LNP는 단기 mRNA 전달에 적합합니다.