AAV-TEM 분석(Transmission Electron Microscopy, TEM)은 아데노연관바이러스(AAV) 입자의 형태 및 캡시드 구조 완전성을 직접 시각적으로 평가할 수 있는 핵심 품질 분석 방법입니다. 연구개발, 공정 최적화, 품질관리(QC) 단계에서 중요한 역할을 합니다.
1. 바이러스 입자의 정상 형성 여부 확인
유전체 역가(gc/mL 또는 vg/mL)가 기준을 충족하더라도 다음 사항을 보장하지는 않습니다:
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완전한 캡시드가 형성되었는지 여부
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구조적 손상 또는 비정상 입자 존재 여부
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응집(aggregation) 발생 여부
TEM을 통해 AAV 특유의 20면체 구조를 직접 관찰하여 구조적 완전성을 확인할 수 있습니다.
2. Empty/Full 캡시드 비율 평가
AAV 생산 과정에서는 다음 두 가지 입자가 함께 존재합니다:
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Full capsid(충전 캡시드): 유전체 DNA 포함
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Empty capsid(빈 캡시드): DNA 미포함
Empty 비율이 높을 경우:
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실제 감염 효율 감소
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동물실험 투여 용량 산정 오류
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임상 개발 리스크 증가
TEM은 형태학적으로 두 입자를 구분할 수 있으며 반정량적 평가가 가능합니다.
3. 역가 또는 발현 이상 원인 분석
다음과 같은 상황에서 TEM 분석이 유용합니다:
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역가는 정상이나 발현 효율이 낮은 경우
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감염 효율이 불안정한 경우
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배치 간 편차가 큰 경우
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동결-해동 후 활성이 감소한 경우
형태 관찰을 통해 응집, 파손, 불순물 오염 여부를 평가할 수 있습니다.
4. 제조 공정 최적화 지원
TEM은 다음과 같은 공정 검증에도 활용됩니다:
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정제 방법 비교(예: 요오딕사놀 밀도구배 vs 크로마토그래피)
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세포 파쇄 조건 평가
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농축 공정 영향 분석
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보관 안정성 시험
5. 품질관리 및 인허가 자료 지원
비임상 연구 및 GMP 생산 단계에서 TEM 데이터는 다음 용도로 활용됩니다:
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배치 출하 보조 시험
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안정성 시험 자료
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IND 제출 자료
About PackGene
PackGene Biotech is a world-leading CRO and CDMO, excelling in AAV vectors, mRNA, plasmid DNA, and lentiviral vector solutions. Our comprehensive offerings span from vector design and construction to AAV, lentivirus, and mRNA services. With a sharp focus on early-stage drug discovery, preclinical development, and cell and gene therapy trials, we deliver cost-effective, dependable, and scalable production solutions. Leveraging our groundbreaking π-alpha 293 AAV high-yield platform, we amplify AAV production by up to 10-fold, yielding up to 1e+17vg per batch to meet diverse commercial and clinical project needs. Moreover, our tailored mRNA and LNP products and services cater to every stage of drug and vaccine development, from research to GMP production, providing a seamless, end-to-end solution.
