AAV / 렌티바이러스 벡터에서의 형광 단백질 선택 및 사용 ― 고객 FAQ

Q1: 왜 바이러스 벡터에 형광 단백질을 삽입하나요?

A:형광 단백질은 바이러스 감염 여부 확인, 감염 효율 평가, 목적 유전자 발현 추적을 위해 사용됩니다.
Western blot이나 qPCR에 비해 빠르고 직관적이며, 특히 감염 양성 대조군으로 많이 활용됩니다.

Q2: AAV와 렌티바이러스에서 형광 단백질 선택이 다른가요?

A: 네, 차이가 있습니다.

렌티바이러스(LV):적재 용량이 커서 EGFP, mCherry, tdTomato 등 다양한 형광 단백질 사용이 가능합니다.

AAV:적재 용량이 제한적이며(약 4.7 kb), 형광 단백질의 크기가 패키징 효율과 바이러스 타이틀에 큰 영향을 미칩니다.

Q3: 가장 많이 사용되고 권장되는 형광 단백질은 무엇인가요?

A: EGFP입니다.

• 안정적인 발현

• 다양한 세포 유형에 적용 가능

• AAV 및 렌티바이러스와 높은 호환성

• 비용 및 실패 위험이 낮음

EGFP는 가장 안전하고 범용적인 선택입니다.

Q4: 적색 형광 단백질은 언제 사용하는 것이 좋나요?

A: 다음과 같은 경우에 적합합니다 (예: mCherry).

• 조직 또는 동물 실험에서 자가 형광이 강한 경우

• GFP와 구분되는 다중 형광 실험

• in vivo 장기 발현 관찰

 AAV의 경우 tdTomato와 같이 큰 형광 단백질은 권장되지 않습니다.

Q5: 형광 단백질을 목적 유전자와 융합해야 하나요?

A: 일반적으로 권장하지 않습니다.

융합 발현(GOI–GFP)은 단백질 기능이나 위치에 영향을 줄 수 있습니다.

권장 구조: 2A 펩타이드 공발현

• 목적 유전자 기능을 유지하면서 형광 단백질을 함께 발현할 수 있습니다

Q6: 바이러스를 감염시켰는데 형광이 보이지 않는 이유는?

A: 다음과 같은 원인이 있을 수 있습니다.

• 세포에 적합하지 않은 프로모터 사용

• 바이러스 투여량(MOI / vg) 부족

• 형광 단백질 성숙 시간 부족

• 현미경 필터 설정 오류

• 목적 유전자의 세포 독성

Q7: AAV에서 형광 단백질이 바이러스 타이틀에 영향을 주나요?

A: 네, 영향을 줍니다.

삽입 유전자가 클수록

• 타이틀 감소

• 빈 캡시드 비율 증가

• 발현 불안정

가능성이 높아집니다.

Q8: 형광 단백질만 발현하는 바이러스 제작이 가능한가요?

A: 가능합니다. 또한 강력히 권장됩니다.

주요 사용 목적:

• 감염 조건 최적화

• MOI 테스트

• 세포/동물 모델 사전 실험

Q9: PackGene은 형광 단백질 및 벡터 설계 컨설팅을 제공하나요?

A: 네, 가능합니다.

PackGene은

• 바이러스 종류(AAV / LV)

• 유전자 크기

• 실험 모델(in vitro / in vivo)

에 따라 최적의 벡터 설계를 지원합니다.

한 문장 요약

형광 단백질은 단순한 표지가 아니라,

바이러스 벡터 성공률을 좌우하는 핵심 요소입니다.