1. 바이러스 역가가 눈에 띄게 감소함
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HEK293T 등 패키징 세포는 전이 후 48–72시간에 바이러스 생산이 가장 높습니다.
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72시간을 지나면 세포 상태가 악화되고 대사 활동이 떨어져, 바이러스 생성량이 감소합니다.
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또한 렌티바이러스는 37℃, 혈청이 포함된 배지에서 안정성이 높지 않아 시간이 지날수록 점차 불활성화됩니다.
2. 바이러스 분해 또는 불활성화가 증가
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배지 내 pH 변화, 단백질분해효소 방출 등으로 인해 장시간 방치 시 바이러스가 더 빨리 분해·불활성화됩니다.
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특히 96시간 이상이 되면 기능적 역가가 30–70%까지 떨어질 수 있습니다.
3. 세포 사멸 증가로 불순물이 더 많아짐
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배양 시간이 너무 길면 세포 탈락·파괴가 증가합니다.
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상청에 세포 파편, DNA, 단백질 등 불순물이 더 많이 섞여 후속 여과 과정이 어려워질 수 있습니다.
4. 바이러스 감염 활성 저하 가능성
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총 역가는 크게 변하지 않더라도 기능적 역가(IFU)가 크게 감소하여 감염 효율이 떨어질 수 있습니다.
추천되는 실제 작업 방식
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가장 좋은 수확 시점: 48시간 + 72시간 두 번 수확
불가피하게 시간을 연장해야 한다면:
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소량의 신선한 완전 배지(10–20%)를 보충
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세포 상태를 최대한 건강하게 유지
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상청 수집 후 즉시 4℃ 보관 후 가능한 빨리 농축/정제 또는 -80℃ 보관
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About PackGene
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