렌티바이러스 형광 단백질 벡터는 EGFP, mCherry, mKO2 등과 같은 형광 단백질 유전자를 렌티바이러스 발현 벡터에 삽입하여 제작한 도구입니다. 패키징 후 세포에 감염시키면 숙주 게놈에 안정적으로 통합되어 장기적이고 지속적인 형광 발현이 가능합니다.
벡터의 핵심 구성요소
1. LTR (Long Terminal Repeat)
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5’LTR: 역전사 시작
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3’LTR: 역전사 종료
(대부분 SIN(Self-Inactivating) 설계로 안전성 향상)
2. Ψ(싸이) 패키징 신호
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유전자가 바이러스 입자에 포장될 수 있도록 하는 필수 요소.
3. 형광 단백질 유전자
대표적인 형광 단백질:
| 형광 단백질 | 색상 | 특징 |
| EGFP | 녹색 | 가장 널리 사용, 발현 강함 |
| mCherry | 빨강 | 광안정성 우수 |
| mTagBFP2 | 파랑 | 스펙트럼 분리 우수 |
| mKate2 | 딥레드 | 생체 이미징 적합 |
| ZsGreen | 밝은 녹색 | 매우 밝지만 크기가 큼 |
4. 프로모터(Promoter)
발현 수준을 결정하는 요소.
자주 사용하는 프로모터:
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CMV: 강한 발현, 범용
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EF1α: 다양한 세포에서 안정적 발현
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UbC / PGK: 중간 발현, 독성 낮음
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CAG: 매우 강한 발현
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세포 특이적 프로모터 (예: Syn, GFAP, CD11b)
5. 선별 마커(옵션)
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Puro, Neo, Hygro, Bla 등 항생제 선택 마커
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이중 형광 시스템도 가능
6. IRES 또는 2A 서열
두 개 이상의 유전자를 동시에 발현할 때 사용:
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IRES: 발현 비율 불균형 가능
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P2A / T2A / E2A: 더 널리 사용, 높은 효율
형광 렌티바이러스 벡터의 주요 적용 분야
✓ 1. 세포주 안정적 라벨링
세포 추적, 분열, 이동, 생존 분석.
✓ 2. 감염/전달 효율 평가
형광 강도로 직접 확인 가능.
✓ 3. 리포터 시스템 구축
예:
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GFP 리포터로 활성 변화 측정
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mCherry로 세포핵/세포막 표지
✓ 4. 다중 색상 세포 추적
녹색·빨강 등으로 그룹별 구분.
✓ 5. CAR-T, 줄기세포 등에서의 감염 검증
형광으로 전환 효율 확인.
대표적인 렌티바이러스 형광 벡터 예시
| 벡터 이름(예시) | 특징 |
| pLenti-CMV-EGFP | 기본적 GFP 발현 |
| pLV-EF1a-mCherry-Puro | 빨강 형광 + 퓨로마이신 선택 |
| pLenti-CAG-ZsGreen | 매우 강한 밝기 |
| pLV-UbC-mKO2 | 중간 발현, 낮은 독성 |
| GFP-P2A-Gene 구조 벡터 | 유전자와 GFP 동시 발현 |
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