1. 왜 LNP 캡슐화 효율이 낮은가요?
가능한 원인:
- N/P 비율 불적절
- 캡슐화 시 pH 조건 미흡 (보통 산성 조건 필요)
- 미세유체 혼합 조건(FRR/TFR) 부적절
- 핵산 순도 부족
해결 방안:
- N/P 비율 최적화
- pH 조건 조절 (약 pH 4.0)
- FRR 및 TFR 최적화
- 고순도 핵산 사용
2. 왜 입자 크기가 크거나 PDI가 높은가요?
원인:
- 혼합 불균일
- PEG-lipid 부족
- 지질 조성 불균형
- 스케일업 시 전단력 변화
해결:
- 미세유체 조건 최적화
- PEG 비율 조정
- 지질 조성 최적화
3. 왜 발현 또는 knockdown 효율이 낮은가요?
원인:
- 엔도좀 탈출 효율 저하
- LNP 구조 불안정
- 핵산 설계 문제
해결:
- pKa 최적화 (6.2–6.5)
- LNP 구조 개선
- 코돈 최적화 및 화학적 수정
4. 왜 LNP 안정성이 떨어지나요?
원인:
- PEG 탈리
- 버퍼 불안정
- 저장 조건 문제
해결:
- PEG-lipid 구조 최적화
- 안정한 버퍼 사용
- 저장 조건:
- 장기: -80℃
- 단기: 4℃
5. LNP는 반복 동결-해동이 가능한가요?
권장되지 않습니다.
이유:
- 구조 손상
- 핵산 누출
- 입자 크기 증가
대안:
- 소분 보관
- 동결-해동 최소화
6. 왜 배치 간 차이가 발생하나요?
원인:
- 지질 원료 차이
- 공정 조건 변동
- 장비 차이
해결:
- 동일 원료 사용
- SOP 표준화
- 장비 조건 통일
7. 왜 자유 핵산이 존재하나요?
원인:
- 캡슐화 효율 부족
- 정제 미흡
해결:
- 조건 최적화
- TFF/SEC 정제 강화
8. 왜 독성이 발생하나요?
원인:
- 이온화 지질 독성
- 과도한 투여량
- 엔도톡신 오염
해결:
- 저독성 지질 선택
- 용량 최적화
- 엔도톡신 관리
9. 왜 in vivo 전달 효율이 낮나요?
원인:
- 타겟팅 부족
- 간으로의 비특이적 분포
- 엔도좀 탈출 부족
해결:
- GalNAc 등 타겟팅 전략 적용
- 지질 구조 최적화
10. LNP 개발 시 필요한 정보는 무엇인가요?
- 핵산 종류
- 적용 방식 (in vitro / in vivo)
- 표적 조직
- 평가 지표
- 품질 기준
About PackGene
PackGene Biotech is a world-leading CRO and CDMO, excelling in AAV vectors, mRNA, plasmid DNA, and lentiviral vector solutions. Our comprehensive offerings span from vector design and construction to AAV, lentivirus, and mRNA services. With a sharp focus on early-stage drug discovery, preclinical development, and cell and gene therapy trials, we deliver cost-effective, dependable, and scalable production solutions. Leveraging our groundbreaking π-alpha 293 AAV high-yield platform, we amplify AAV production by up to 10-fold, yielding up to 1e+17vg per batch to meet diverse commercial and clinical project needs. Moreover, our tailored mRNA and LNP products and services cater to every stage of drug and vaccine development, from research to GMP production, providing a seamless, end-to-end solution.
