AAV 바이러스 패키징 3-플라스미드 시스템 (FAQ)

Q1: AAV 바이러스 패키징에는 어떤 플라스미드가 사용되나요?

AAV 바이러스는 일반적으로 3-플라스미드 공동 형질도입 시스템을 사용하여 생산됩니다.
사용되는 플라스미드는 다음과 같습니다.

 1. AAV 발현 플라스미드 (Transfer / Expression Plasmid)

 2. AAV 패키징 플라스미드 (Rep-Cap Plasmid)

 3. 헬퍼 플라스미드 (Helper Plasmid)

Q2: AAV 발현 플라스미드의 역할은 무엇인가요?

AAV 발현 플라스미드는 목적 유전자를 포함하는 핵심 플라스미드입니다.

주요 특징:

• 양쪽 말단에 ITR(Inverted Terminal Repeat) 서열 포함

• ITR 사이에 완전한 유전자 발현 카세트(프로모터, 목적 유전자, 태그, polyA 등) 구성

📌 최종 AAV 바이러스 입자에 실제로 포장되는 유일한 유전자 서열입니다.

Q3: Rep-Cap 플라스미드는 어떤 역할을 하나요?

Rep-Cap 플라스미드는 AAV 복제와 캡시드 형성에 필요한 유전자를 제공합니다.

• Rep 유전자: AAV 유전체 복제 조절

• Cap 유전자: AAV의 혈청형(AAV2, AAV8, AAV9 등) 결정

📌 혈청형 변경은 Rep-Cap 플라스미드를 교체함으로써 이루어집니다.

Q4: 헬퍼 플라스미드는 반드시 필요한가요?

네, 반드시 필요합니다.

헬퍼 플라스미드는 아데노바이러스 유래 보조 유전자(E2A, E4, VA RNA 등)를 제공하여

• AAV 복제 활성화

• 바이러스 입자 조립 촉진 역할을 합니다.

📌 헬퍼 플라스미드는 AAV 바이러스 입자에 포장되지 않습니다.

Q5: 왜 세 개의 플라스미드가 필요한가요?

AAV는 복제 결손형 바이러스로, 단독으로는 증식이 불가능합니다.
3-플라스미드 시스템을 사용하면:

• 생산 공정의 안전성 향상

• 야생형 AAV 생성 위험 감소

• 안정적이고 효율적인 패키징 이 가능합니다.

Q6: 세 플라스미드 모두 바이러스에 들어가나요?

아니요.

• 바이러스 입자에 포장됨: AAV 발현 플라스미드 (ITR 사이 서열)

•  포장되지 않음: Rep-Cap 플라스미드, 헬퍼 플라스미드