1. 렌티바이러스의 유전자 크기 한계
렌티바이러스(Lentivirus)는 일반적으로 최대 약 8~9 kb 까지만 포장할 수 있습니다.
이 크기에는 벡터 내 모든 서열(LTR, ψ 시그널, 프로모터, 선택마커 등)이 포함됩니다.
| 구분 | 권장 총 길이 |
| 이상적인 크기 | ≤ 7 kb |
| 최대 한계 | ≤ 9 kb |
| 9 kb 초과 | 역가(titer) 급감 또는 입자 형성 불가 |
2. 목적 유전자가 너무 클 때 발생하는 문제
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바이러스 생성량 감소
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감염 효율 저하 (RNA 포장 불완전)
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세포 내 발현 불안정 또는 유전자 손실
3. 해결 방법
① 벡터 길이 최소화
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짧은 프로모터 사용 (예: EF1α short, PGK 등)
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불필요한 형광/항성 유전자 제거
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최소한의 필수 요소만 남긴 단일 기능 벡터 사용
② 2개 벡터로 분할 (Split system)
큰 유전자를 두 부분으로 나누어 각각 별도의 렌티벡터로 포장하고,
세포 내에서 다음과 같은 방식으로 재결합시킵니다.
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중첩 서열 재조합 (overlap recombination)
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재조합 효소 시스템 (Cre/LoxP, Flp/FRT 등)
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AAV의 이중 벡터 시스템과 유사한 trans-splicing 방식
③ 다른 바이러스 시스템 사용
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아데노바이러스 (Adenovirus) → 최대 30~35 kb 가능
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AAV 이중 벡터 시스템 → 장기 발현 가능
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